Sono esami del sangue di routine. Quelli più importanti ai fini della prevenzione sono sicuramente HOMA INDEX, HB GLICATA,VITAMINA D, FIBRINOGENO, FERRITINA, HDL, TRIGLICERIDI, OMOCISTEINA, APO-B, LIPOPROTEINA (Lpa).
In particolare il rapporto Trigliceridi/HDL riflette meglio di altri parametri quanto siamo in grado di ridurre l'infiammazione associata all'alimentazione.
E' un marker indiretto di insulino-resistenza, in particolare nel fegato, ma anche in altri organi sensibili all'insulina (muscoli, tessuto adiposo, cervello).
L'insulina è l'ormone che controlla gran parte del metabolismo che si svolge a livello epatico. Una delle prime conseguenze dell'infiammazione indotta dall'alimentazione nel fegato è lo sviluppo di insulino-resistenza proprio in quest'organo. Ne deriva una disfunzione nel processo di produzione di lipoproteine che sfocia in un aumento dei trigliceridi e una diminuzione del colesterolo HDL.
L'obiettivo è un rapporto Trigliceridi/HDL in feriore a 1 o non superiore a 2.

Un altro importantissimo marker clinico è l'Hb Glicosilata (Emoglobina glicosilata) che definisce sia la capacità di riparare il tessuto danneggiato dall'infiammazione cellulare sia di misurare indirettamente i livelli di stress ossidativo. Valori di Hb Glicosilata al di sopra di 5,1% sono la conseguenza della sovrapproduzione di radicali liberi, i quali, a loro volta, indicano che le cellule producono meno energia da destinarsi alla riparazione dei tessuti. 
Anche valori al di sotto di 4,9% devono essere oggetto di attenzione perchè potrebbero riflettere un aumento della secrezione di cortisolo volta a mantenere i livelli di glucosio nel sangue attraverso il processo della gluconeogenesi.
Il valore tra 4,9 - 5,1% è considerato ideale.
Gli esami bioumorali da soli però non sono sufficienti per dare un quadro completo sul rischio cardio-metabolico futuro (vedi spiegazione più avanti). Sono comunque esami da eseguire prima di una eventuale visita clinica cardiologica di prevenzione.

Figura 2. Determinazione del rapporto pro-infiammatorio AA/EPA tramite Lipidomica eritrocitaria in quattro popolazioni. I dati sono stati costruiti in collaborazione con il Dr. Fusco, la Dr.ssa Virgili esperta in nutrizione oncologica ed un centro di ricerca dell'Università di Camerino.
Entrambi gli studi in via di pubblicazione sottolineano come ci siano markers in grado di stimare l'inflammaging di basso grado, darne una precisa valutazione in termini di rischio, permettendo di agire sulla prevenzione di patologie degenerative. Questi markers avranno sempre di più una importanza strategica in ambito clinico per costruire percorsi di medicina integrata di precisione, differenziati e individuali.

L'Omega-3 Index su membrana eritrocitaria è da molti considerato uno dei principali biomarker(s) per le patologie cardiovascolari e recentemente correlato all'aumento di patologie oncologiche . L'indice è la somma dei PUFA Omega_3 (DHA + EPA, gli Omega_3 da pesce) e ci indica se l'apporto nutrizionale è deficitario, buono o ottimale secondo linee guida internazionali . L'apporto dietetico è indispensabile e cruciale in quanto i PUFA a differenza dei SFA e MUFA non possono essere sintetizzati a livello endogeno ma possono essere assunti solamente dalla dieta, da qui la definizione, per larga parte sottovalutata, di Acidi Grassi Essenziali (EFA: Essential Fatty Acids).

La determinazione del rapporto Omega-6/Omega-3 e di Omega-6 pro-infiammatori (quali l'Acido Arachidonico) su membrana eritrocitaria è ad oggi il test più significativo per individuare la persistenza di infiammazioni silenti ed è uno dei principali marker(s) utilizzati dal biochimico di fama internazionale Barry Sears nella lotta all'infiammazione cronica . Mentre il rapporto tra grassi saturi e insaturi va progressivamente migliorando all'interno della popolazione, il rapporto tra PUFA Omega-6 e Omega-3, la cui proporzione ideale si situa tra 4:1 e 2:1, è attualmente così squilibrato che l'ultimo rapporto della FDA statunitense parla di un rapporto medio nella comune alimentazione di ben 25:1 (in Europa siamo attorno al 15:1) . Individuare un rapporto Arachidonico/EPA molto alto nella membrana eritrocitaria sottolinea una cascata pro-infiammatoria che non viene neutralizzata dagli Omega_3 anti-infiammatori. Tale segnale infiammatorio può essere il sintomo di carenze di PUFA Omega_3, alimentazione satura in PUFA Omega_6 (cereali, prodotti da forno, oli di semi), segnali ormonali, insulinemia, disfunzioni metaboliche.

Individuare il pattern lipidico ottimale per longevità ed Invecchiamento. Numerosi e recenti trials clinici hanno utilizzato l'esame di Lipidomica eritrocitaria per predire il fattore di rischio per tutte le cause di mortalità. Nello studio Framingham Offspring Cohort 2260 pazienti senza patologie CAD evidenti e pregresse sono stati monitorati per 11 anni . In questo periodo 8 fattori di rischio classici più utilizzati (età, sesso, colesterolo totale, colesterolo-HDL, ipertensione, fumo, diabete II) sono stati correlati a markers estrapolati dalla Lipidomica eritrocitaria con tutte le cause di mortalità. L'enorme studio ha indicato come l'Omega_3 Index abbia una correlazione a tutte le cause di mortalità almeno pari ad altri 6 markers classici di rischio CAD ed i migliori modelli nella previsione di rischio cardio metabolico includono la lipidomica eritrocitaria insieme a fumo di sigaretta e diabete II. Un altro autorevole studio condotto su 2500 partecipanti (età media maschile 66 anni, femminile 54 anni) nel Framingham Heart Study ha portato ad individuare come un elevato Omega_3 Index abbia una correlazione inversa per tutte le cause di mortalità, per mortalità che non includono patologie cardio-vascolari e oncologiche e per eventi CAD (arresti cardiaci e patologie ischemiche). Gli autori hanno individuato come i pazienti che hanno un Omega_3 Index >6.8% hanno una riduzione sia del 35% di incorrere a tutte le cause di mortalità che del 39% ad eventi CAD rispetto a pazienti con un basso Omega_3 Index (<4.2%). Gli stessi autori hanno sottolineato come elevati livelli di Omega_3 presenti nella membrana eritrocitaria siano associati a longevità e riduzione significativa di eventi CAD. Inoltre diversi studi usciti negli ultimi anni hanno evidenziato come variazioni nel profilo lipidomico di acidi grassi mono-insaturi (MUFA) e acidi grassi saturi (SFA) possano essere la spia di dis-metabolismi correlati al rischio oncologico, obesità ed insulino resistenza mediante feedback endogeni come riportato da Berrino per il tumore al seno .

Individuare il corretto contenuto di DHA. Il DHA è un acido grasso Omega-3 ed è il principale componente del cervello, tanto che nelle membrane nervose e sinaptosomali plasmatiche rappresenta circa un 35% della porzione acidica totale. Proprio per questo, esso è essenziale per il corretto sviluppo neurale del bambino e più in generale per la plasticità sinaptica.

Perché utilizzare la membrana del globulo rosso? Essa riflette l'apporto dietetico a medio termine, ed è anche più stabile di quella dei lipidi plasmatici, che fluttuano secondo l'apporto a breve termine. Inoltre l'eritrocita maturo non può più biosintetizzare lipidi, perciò la sua stabilità di membrana dipende anche dagli scambi che effettua con le lipoproteine circolanti. Infine, essendo la vita media dell'eritrocita di 120 giorni, il monitoraggio di un cambiamento nella biosintesi o apporto dietetico sulla composizione delle membrane può essere ottenuto con prelievi a distanza di circa 4 mesi l'uno dall'altro
 

Figura 2. Il colesterolo LDL potrebbe sottostimare il numero di particelle LDL in soggetti con una prevalenza di small dense LDL. Nella figura sopra la concentrazione colesterolo-LDL è identica sia nel fenotipo A che nel fenotipo B. Poiché le particelle LDL contengono solamente una molecola di APO-B, la concentrazione di APO-B è molto alta nel fenotipo B, in cui si ha una prevalenza di sdLDL rispetto al fenotipo A con una prevalenza di IbLDL.
CH: contenuto di colesterolo nelle particelle LDL; IbLDL: particelle LDL grandi e galleggianti; sdLDL: particelle LDL piccole e dense.
Helena Vaverkova. LDL‑C or apoB as the best target for reducing coronary heart disease: should apoB be implemented into clinical practice? Clin. Lipidol. (2011) 6(1), 35–48

Figura 3. Nell’Ipotesi della “Oxidative Modification” nella patogenesi dell’aterosclerosi, le OxLDL sono generate nei tessuti della parete dei vasi nella fase iniziale dell’aterogenesi. Le OxLDL circolano tra la parete del vaso e si accumulano gradualmente nel tempo nelle lesioni premature. Durante la rottura della placca aterogena, si viene a formare un trombo con l’occlusione del flusso sanguigno. Nella fase acuta (stadio in cui si possono avere valori di hs-pcr elevati) dopo la rottura della placca, una larga quantità di OxLDL e OxLDL degradate vengono rilasciate in circolo: in questo lasso di tempo si hanno picchi elevati di OxLDL plasmatici e un aumento della concentrazione plasmatica di OxLDL è stata dimostrata nei pazienti con instabilità di placca (Holvoet P. et al. Oxidized low density lipoprotein is a prognostic marker of transplant-associated coronary artery disease. Arterioscler Thromb Vasc Biol 2000; 20: 698–702).
OxLDL: LDL ossidate; OxLDL Foam Cell: placca schiumosa lipidica generata da LDL ossidate.

Che cosa sono le small-dense LDLs
Le lipoproteine a bassa densità (LDLs; Low-Density Lipoproteins) sono particelle deputate al trasporto dei lipidi in tutto l’organismo. Ciascuna particella contiene una combinazione di proteine, colesterolo, trigliceridi e molecole fosfolipidiche (Figura 1). Le particelle di LDLs circolanti hanno dimensioni, densità e composizioni chimiche eterogenee, e possono essere classificate in due fenotipi distinti: il fenotipo A è associato a LDLs più grandi e a densità più bassa, mentre il fenotipo B mostra una predominanza di particelle piccole e dense (small-dense LDLs, sd-LDL) .
Perché misurare le sd-LDL
Concentrazioni elevate di lipoproteine ​​LDL piccole e dense (sd-LDL) si correlano positivamente con il rischio di malattia vascolare coronarica (CVD): sono particelle altamente aterogene a causa della loro maggiore penetrazione nella parete arteriosa (“small-dense”), con una minore affinità di legame per il recettore LDL che comporta un’emivita in circolo più prolungata, e una conseguente maggior esposizione – quindi minor resistenza – agli agenti ossidanti dei ROS (sono cioè le particelle LDL più facilmente ossidabili) . Secondo il National Cholesterol Education Program (NCEP), solo la metà della percentuale del rischio di malattia coronarica può essere attribuita a fattori di rischio convenzionali (cioè LDL, HDL e trigliceridi). Altri fattori più specifici aumentano il potere predittivo di malattie cardiovascolari e selezionano individui a rischio che altrimenti potrebbero non essere inclusi. Le LDL piccole e dense costituiscono uno di questi indicatori più sensibili, e possono essere indipendenti dagli altri fattori di rischio convenzionalmente utilizzati negli ultimi cinquant’anni . Inoltre, le ultime Review internazionali hanno evidenziato una bassa correlazione tra colesterolo-LDL e mortalità negli individui sopra i 60 anni, ponendo dei punti interrogativi sull’ipotesi del colesterolo-LDL quale marker di rischio cardiovascolare principale .
Le sd-LDL nella Sindrome Metabolica
La Sindrome Metabolica (detta anche sindrome da insulino-resistenza) è una combinazione pericolosa di alcuni fattori di rischio cardiovascolare che, correlati tra loro, possono dare forma ad un quadro clinico più facilmente esposto al rischio di infarto o ictus. Diversi studi clinici hanno evidenziato la forte correlazione tra l’elevato numero di sd-LDL e markers che caratterizzano il “fenotipo lipoproteico pro-aterogeno” (Trigliceridi e Apo-B elevati, bassi livelli di colesterolo-HDL) che spesso coesistono senza evidenti aumenti del colesterolo-LDL .
L’apolipoproteina B (Apo-B) è una componente di tutte le particelle aterogene o potenzialmente aterogene, incluse le VLDL, le lipoproteine a densità intermedia (IDL), le LDL e la lipoproteina(a) , nelle quali ogni particella lipoproteica contiene una molecola di apo B. Apo B, quindi, fornisce una misura diretta del numero di lipoproteine aterogene in circolo. Anche nei soggetti che presentano ipertrigliceridemia, la maggior parte dell’Apo-B plasmatica è associata al colesterolo-LDL, il che rende questa apolipoproteina un buon indicatore del numero di particelle LDL (LDL-P), piuttosto che della loro concentrazione (LDL-C).
Nella Figura 2 sotto sono evidenziati due diversi esempi (fenotipo A non aterogeno e fenotipo B aterogeno), in cui si ha la stessa concentrazione di colesterolo-LDL, ma valori di Apo-b differenti (con marcata prevalenza nel fenotipo B) a causa della diversa distribuzione delle sd-LDL .
Nel 2013, l’Associazione Americana di Chimica Clinica (AACC), ha redatto un documento dove si pongono a confronto - come indicatori di aterogenesi – i classici marcatori lipidici con l’Apolipoproteina B (Apo-B) e le particelle sd-LDL; dallo studio è emerso come questi ultimi indicatori siano specificamente più predittivi del rischio cardiovascolare, rispetto al colesterolo-LDL comunemente usato .
L’ipotesi ossidativa nei processi aterogeni
La patogenesi dell’aterosclerosi include la suscettibilità genetica e una varietà di fattori di rischio cardiovascolari ed influenze ambientali. Evidenze sperimentali sempre più solide suggeriscono che, in associazione ai fattori di rischio cardiovascolari “classici”, i fenomeni infiammatori ricoprono una posizione di rilievo nella dinamica del processo aterosclerotico coronarico e delle Sindromi Coronariche Acute (SCA). Pertanto i markers sistemici di infiammazione stanno assumendo un ruolo sempre più importante nella stratificazione prognostica e nella gestione terapeutica dei pazienti con SCA. Questa risposta infiammatoria è sostenuta e/o stimolata dallo stress ossidativo, che può costituire la connessione tra i disturbi lipidici e l’infiammazione. Da oltre 20 anni è noto che lo stress ossidativo, in particolare l’ossidazione delle LDL, può influenzare lo sviluppo della malattia aterosclerotica
Il colesterolo LDL è ancora più pericoloso quando diventa ossidato, vedi Figura 3. Le LDL ossidate sono più reattive con i tessuti circostanti e possono depositarsi all'interno del rivestimento delle arterie.  Macrofagi, colesterolo e altri lipidi sono i partner implicati nella formazione di placche con rischi cardiovascolari conclamati (aterosclerosi).
Gli eventi iniziali dell'aterogenesi vanno identificati sia nel danno dell'endotelio, sia nell'accumulo e la modificazione (per aggregazione, ossidazione e/o glicosilazione) delle lipoproteine a bassa densità (LDL) nell'intima delle arterie, due eventi che si verificano precocemente e che si potenziano a vicenda. Penetrati nell'intima, i macrofagi fagocitano le lipoproteine modificate e, a causa dell'impossibilità di metabolizzare il colesterolo in esse contenuto, si trasformano nelle cellule schiumose (o spumose) caratteristiche delle strie lipidiche (fatty streaks).
Questa ipotesi, sempre più accreditata dalle ultime Review internazionali , dà una nuova e importante rilevanza alla determinazione delle sd-LDLs, per la loro suscettibilità molto più alta alla modificazione ossidativa da parte dei ROS. Vi è infatti una marcata correlazione tra l’aumento delle sd-LDLs e l’aumento delle LDL-ossidate.

sd-LDL markers del futuro
Molte Review internazioni hanno oramai stabilito che quantità elevate di LDL nel plasma non giustificano da sole l'aterogenicità associata a queste particelle, ed è significativo che livelli plasmatici simili di LDL possono essere associati a gradi diversi di rischio cardiovascolare. Livelli simili di LDL-C possono essere associati a diversi gradi di rischio CV e l'utilizzo di LDL-C per valutare il rischio di CHD correlato al colesterolo sottostimerà il rischio effettivo negli individui che possiedono livelli ottimali di LDL-C ma alti livelli di sd-LDL. Secondo le attuali linee guida AACE (2017), sdLDL è stato incluso come un “fattore di rischio addizionale” per ASCVD, insieme con obesità, storia familiare, apolipoproteina B elevata, ipertrigliceridemia, PCOS e triade dislipidemica (costituita da ipertrigliceridemia, bassi livelli di HDL-C ed un eccesso di sdLDL-C) .